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母婴ABO血型不合的新生儿HDN检测<sup>*</sup>
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摘要:新生儿溶血病(HDN)为新生儿时期的特有疾病,属于溶血性疾病,发病原因是母婴血型不合,之后母体对应血型抗体经过胎盘传输给胎儿,会发生红细胞被严重破坏的情况,导致新生儿患有
新生儿溶血病(HDN)为新生儿时期的特有疾病,属于溶血性疾病,发病原因是母婴血型不合,之后母体对应血型抗体经过胎盘传输给胎儿,会发生红细胞被严重破坏的情况,导致新生儿患有溶血病,其中ABO血型不合发生率高;临床症状主要为黄疸、手足部徐动、贫血、水肿、腹水等,部分患儿若病情严重,易出现智力与运动障碍,严重的情况下会致使新生儿死亡,该疾病的临床治愈难度较大,预后效果不佳,所以需要孕产妇与其配偶在孕期及时进行血型系统(ABO与Rh等)检查,预防该疾病,如果新生儿已经检出溶血病,则需要积极配合医生进行退黄、并发症预防的治疗,以期取得理想的预后结果[1]。研究现阶段新生儿HDN的临床检查情况,发现血清学检查效果,通过多项试验检测阳性反应,可提示新生儿是否患有HDN,以此为后续医生制定行之有效的治疗方案提供依据,有效减轻该疾病给患儿与家长带来的诸多痛苦与压力。基于此本研究选取120例疑似母婴ABO血型不合新生儿HDN患者,进行了实验室血清学检测,依据三项试验阳性结果探究了检测新生儿HDN时血液标本采样的最佳时机与疾病阳性确诊的重要标准。 1资料与方法 1.1一般资料 选取我院在2018年1月—2019年1月接收的新生儿HDN患儿120例作为研究对象来研究,这些患儿均于我院娩出,出生时间不超过10天,经过临床医生初步症状(黄疸)检查确定为母婴ABO血型不合的新生儿HDN疑似患儿,为了进一步明确病情,我院对120例疑似新生儿HDN患儿进行了实验室血清试验检测;患儿中男多于女,人数分别为70例、50例。 1.2方法 采集120例患儿抗凝血各2ml,母婴血型分别通过产妇问病史记录、微柱凝胶卡检测获得,其中患儿直接抗人球蛋白试验也通过黛安娜新生儿HDN微柱凝胶卡检测得出,游离试验、抗体释放试验通过酸放散试剂得出检测结果。准备ABO各型血液标准红细胞、抗A或B标准血清、抗人球蛋白卡(戴安娜公司生产,DGGel Coombs卡)、离心机、酸放散试剂(包括放散液A、放散液B和中和液)、生理盐水、孵育箱(恒温37℃)等。①直接抗人球蛋白试验:通过黛安娜新生儿HDN微柱凝胶卡上机检测可得出。 ②游离抗体试验:取ABO各型血液标准红细胞各50μl依次加入抗人球蛋白卡片,将患儿血液标本离心,取上清液,分别取50μl加入放有ABO各型血液标准红细胞的卡片中,放置孵育箱孵育15 min,离心,观察结果。 ③抗体释放试验:将患儿血液标本用生理盐水洗涤,次数为3次,取500μl红细胞压积于试管中,同时加入500μl放散混合液(A400μl+B100μl),混匀,并离心,取离心后的上清液400μl、放入试管中,于试管中加入中和液3滴,再次离心后取上清液待用,取ABO各型血液标准红细胞各50μl,依次加入抗人球蛋白卡片,依次加入再次离心后的上清液50μl,放孵育箱孵育15分钟,离心,观察结果。 1.3观察指标 ①试验的阳性判断标准,阳性:红细胞出现凝聚且位于凝胶柱的中上层,与相应的抗体发生凝集;阴性:红细胞出现凝聚且位于柱的底层,未与相应的抗体发生凝集。②与③试验检测阳性标准为检出了能够与患儿红细胞发生反应的抗体。患儿血液血清经过实验室溶血三项试验检测后,均显示为阳性,提示患儿患有HDN(阳性),单一进行抗体释放试验,结果呈阳性判断患儿HDN阳性,其他两项试验单一检测阳性提示患儿疑似HDN阳性,这两项试验检测阳性结果分别联合③试验检出阳性结果与临床症状后可判断患儿疾病阳性。 1.4统计学方法 使用SPSS.15软件统计学分析数据,计数资料[n(%)]表示、χ2检验,P≤0.05为数据差异有统计学意义。 2结 果 采样时机:120例疑似新生儿HDN的患儿检查后,可知103例疑似患儿最终确诊,检出率为85.83%,患儿血液标本采集时间设计为2个时间段,即刚出生至出生2 d、3~6 d,各个时间段标本采集例数各为60例,通过血清三项试验阳性检测后,这2个时间段检出新生儿HDN患儿例数合计103例,分别为97例(94.17%)、6例(5.83%),检出患儿例数进行不同时间段的数据比较后P<0.05,有统计学意义,其中新生儿出生2天内采集样本检出疾病率高,6 d左右时检出疾病人数少,说明新生儿HDN检出率与疑似患儿出生后血液标本采集时间呈正相关关系,标本采集时间愈早,血清三项试验检测后的阳性率愈高;血清检测结果:103例ABO血型不合新生儿HDN患儿可分为母O、O、A、B、B与婴A、B、AB、AB、A的情况,患儿例数分别有75例、25例、1例、1例、1例,①、②、③项试验单一检出阳性患儿例数分别为37例(35.92%)、62例(60.19%)、101例(98.06%),其中在①试验中仅检出母婴O-A、O-B血型不合的新生儿HDN病例,②试验中未检出B-A血型不合疾病患儿
文章来源:《母婴世界》 网址: http://www.mysjzzs.cn/qikandaodu/2020/0628/331.html